详细说明
为了在充分表征或多重遗传背景下提供等位基因,经常将等位基因移至与等位基因首次表征的遗传背景不同的遗传背景。下面总结的表型是针对亲本系的:C57BL/6;129S4 遗传背景上的 Vip-IRES-Cre 敲入小鼠(库存号010908)。应该注意的是,这种 C57BL/6J 同类 Vip-IRES-Cre 敲入品系(库存号 031628;Vip-IRES-Cre (C57BL/6J) 或 B6J.Vip-IRES-Cre)的表型可能会有所不同来自它所源自的亲本。下面的表型描述了亲本系(库存号 010908)。
Vip-IRES-Cre 等位基因在血管活性肠多肽基因座的 3' UTR 中包含一个内部核糖体进入位点和 Cre 重组酶。贵宾)。因此,它被设计为具有内源性Vip启动子/增强子元件,指导新皮质、海马、嗅球、视交叉上核和其他离散中脑和脑干区域中的cre表达。当 Vip-IRES-Cre 小鼠与含有loxP侧翼序列的小鼠交配时,Cre 介导的重组将导致后代Vip表达细胞中floxed 序列的缺失。虽然 Vip-IRES-cre 旨在保留内源性Vip表达,但 2019 年的一份出版物表明该等位基因降低了Vip表达式 - 请参阅下面的详细信息。因此,研究人员可能会使用纯合小鼠进行繁殖,但应考虑在所有研究中使用杂合 Vip-IRES-Cre 小鼠和野生型同窝小鼠对照。
2010 年,捐赠研究人员报告说,Cre 重组酶活性特异且有效(主要通过高效重组重现了内源性Vip表达模式)。他们报告了一些 GABA 能中间神经元中的 Cre 重组酶活性,但没有检查Cre在肠道或大脑以外的组织中表达。来自该 Vip-IRES-Cre 等位基因的 VIP 表达未由捐赠研究人员评估(2010 年 1 月) - 请参阅下面的其他详细信息。他们还报告说,纯合小鼠是有活力的、可育的、大小正常的,并且没有表现出任何明显的身体或行为异常。
有关表征信息,请参阅艾伦脑科学研究所网站上的图像(Vip-IRES-Cre 图像)。
如果杰克逊实验室的遗传资源科学小组进一步表征了该等位基因的重组酶活性模式,则此类发现将报告在小鼠基因组信息学 (MGI) 等位基因详细条目 ( Vip tm1(cre)Zjh)。搜索MGI 重组酶活性数据库也可以找到相同的信息。
虽然这个 Vip-IRES-cre 等位基因被设计为 3' 敲入等位基因,但Cheng等人。2019 J Biol Rhythms (PMID:31452438)表明 Vip-IRES-cre 等位基因降低了Vip表达。当在 2 日龄时检查时,Vip-IRES-cre 杂合子在下丘脑核的视交叉上核 (SCN) 中表现出由 Vip 基因编码的神经肽产物(VIP 和肽组氨酸异亮氨酸 [PHI])的表达降低,相比之下到野生型同窝仔。SCN 中 VIP/PHI 阳性神经元的总数在 Vip-IRES-cre 杂合子和野生型同窝仔之间没有差异——排除了 VIP/PHI 神经元的潜在损失。其他神经肽的表达没有改变。杂合子小鼠的跑轮活动节律不受影响。